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Bioss讲堂|Streptavidin-Biotin系统
发表者:北京亚美游生物      发表时间:2018-9-30

简介


链霉亲和素(Streptavidin, SA)是由链霉菌分泌的一种大约55 kDa的蛋白,生物素(Biotin)是分子量仅244的小分子。SA和Biotin具有非常独特的亲和性,其解离常数Kd≈10−14 mol/L,甚至高于抗原-抗体,是自然界中最强的非共价连接之一。它们形成的复合物非常稳定,可以像“生物胶水”一样将需要偶联、固定的分子、标签或支持物连接在一起,方便而不易解离,因而广泛用于生物学研究中。



应用举例

  • Biotin分子量很小,对被标记的抗体或蛋白构象影响几乎可以忽略,保持了抗体或蛋白的天然活性。用多种生物素标记抗体与血液样本作用后,利用偶联有SA的磁珠可结合标记抗体,这常用于磁珠法对特定细胞进行负选的实验中;

  • 细胞结合biotin标记抗体后,可利用包被SA的荧光胶珠进行细胞分选;

  • Biotin标记的抗体或蛋白还可以偶联在包被SA的基片上,制成抗体或蛋白芯片;

  • 利用SA标记荧光素,可与biotin标记的抗体结合,这样就形成了一个带荧光标签的抗体。这样可以方便地选择和更换不同的SA标记产品对抗体进行标记,而不需购买许多标记抗体;

  • Biotin标记的蛋白或小分子可用于研究蛋白-蛋白、蛋白-小分子相互作用,比如用于IP实验中;

  • Biotin还可以标记DNA,用于研究转录因子。

注意事项

  • 天然样本中可能会含有内源性biotin,在IHC等实验中可能造成假阳或高背景,应用封闭或高温法消除;

  • 高浓度SA在中性条件下可能会聚沉,尤其当溶解冻干品时。可考虑使用偏碱性(pH8.5)溶液制备为2×工作液。




Bioss链霉亲和素标记产品


货期

  1. 包括定制标记在内所有产品7-10天内发货,新鲜制备以保证荧光产品在用户手中更长的有效期;

  2. 小分子多肽和化合物因分子量较小,标记和纯化需要特殊处理,价格和标记周期根据样品特性而定。



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