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Bioss产品星推荐|ELISA试剂盒 免费代测 免费代测
发表者:北京亚美游生物      发表时间:2018-12-10

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高灵敏度及特异性:可准确识别样本中低含量的目标检测物;

快速简便操作:无需昂贵设备及相关操作经验;

稳定性:实验重复性良好,变异系数低;

种类丰富:提供多种选择性;

实验数据易于处理分析。

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以上列表中ELISA试剂盒均采用双抗体夹心法,此方法是检测抗原最常用的方法。


双抗体夹心法ELISA实验方案

双抗夹心法是指将特异性结合抗原的抗体包被于微孔板上,制备成固相抗体,向微孔板中分别加入标准品或待测样本,再与HRP标记另一株特异性针对抗原的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,加入TMB底物显色后,形成有色产物,产物的量与样本中抗原的量呈正相关,再由酸终止反应。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过拟合标准曲线计算样本中抗原含量。

注:双抗体夹心法必须采用经测试过的配对抗体进行。


ELISA实验注意事项:

在临床检验中,此法适用于检测各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、HCG等。

只要获得针对受检抗原的特异性抗体,就可以用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。

如抗体的来源为血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。

如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。

这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。


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